Правда ли, что образец пуповинной крови, других тканей и клеток человека любого качества сохранят в частном банке пуповинной крови просто по желанию клиента, достаточно лишь оплатить его хранение?
С самого начала существования банков пуповинной крови, частных и государственных, персонализированных и донорских, во всех странах существовали критерии отбора, которым должен соответствовать каждый собранный образец биоматериала и депозиты, полученные из них.
Законодательства разных стран, регулирующие деятельность банков пуповинной крови, конечно, различаются. Практически все первые биобанки ориентировались на нормы сохранения для гемопоэтических стволовых клеток из костного мозга и периферической крови. Со временем появились специфические параметры, присущие именно пуповинной крови, тканям пуповины и плаценты, мезенхимальным стромальным клеткам из пуповины, плаценты, жировой ткани, нервного гребня и т.д. Мировая глобализация, необходимость обмена депозитами между банками, необходимость применения в клиниках различий стран привели к стандартизации основных показателей.
В настоящее время наиболее признанными являются критерии принятые FACT (NetCord-FACT International Standards for Cord Blood Collection, Banking and Release for Administration). Современные банки, в том числе и ГЕМАФОНД, утверждают свои внутренние протоколы и процессы (СОПы), согласно именно стандартов FACT.
Какие основные показатели оценивают в частных банках?
Прежде всего, это температурный режим и время доставки биоматериала в лабораторию. Для донорских банков допустимы 48 часов транспортировки (идеально – до 36 часов), для частных – 72 часа, потому что падение жизнеспособности клеток пуповинной крови начинается уже через 36 часов после сбора. Ткани пуповины и плаценты можно транспортировать в специальной среде до трех суток.
Входной контроль. Материал оценивают визуально – наличие повреждения, нарушение герметизации контейнера или отсутствие соответствующего данному материалу контейнера, наличие остатков мекония, слизи, неестественный цвет и консистенция тканей – это показатели для более тщательной проверки или даже отказа принять образец к обработке.
Проверяется также маркировка и правильность заполнения сопроводительных документом.
Образец пуповинной крови обязательно взвешивают: для частных банков критическим весом является вес менее 20 г цельной крови, без учета веса пакета и антикоагулянта; для донорских – вес менее 50 г. Ткани человека измеряют, определяют длину, объем, цвет, консистенцию, наличие примесей крови и т.п.
Контроль отсутствия инфекций. Весь материал, а также венозная кровь роженицы обследуются на маркеры гемотрансмиссивных инфекций – на антитела и методом ПЦР. Ткани обследуют дополнительно на наличие урогенитальных инфекций. При положительных результатах исследования донорский материал утилизируется. В частных банках возможно сохранение материала только при наличии антител, образцы с активной инфекцией всегда утилизируются. Данные обследования несут важную информацию для оценки состояния здоровья новорожденного и роженицы. Благодаря своевременным результатам семьи неоднократно получали информацию о необходимости обращения к профильным специалистам, например, при обнаружении вируса гепатита С. При наличии антител в депозитах они хранятся в биобанке только в специальных криохранилищах, отдельно от других депозитов.
Количественный состав образца. При хранении уже выделенных клеток обязательно фиксируется количество клеток в каждой криоемкости и депозите в целом.
Фенотипирование. Каждый тип стволовых клеток имеет свои маркеры, которые показывают их принадлежность и терапевтические возможности. Так, например, гемопоэтические стволовые клетки пуповинной крови оценивают по CD34+ и CD45+, их содержанию в ЛТК (лейкоцитарной фракции). Именно эти показатели и общее количество клеток используют при расчете терапевтической дозы перед трансплантацией.
Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) дополнительно оценивают на специфические маркеры: CD 73+, CD 90+, CD 105+, HLADR+, CD 19+. Все показатели сравниваются с референтными значениями для оценки качества депозита. Принятые в лаборатории референтные значения соответствуют критериям определения МСК, установленным Международным обществом по клеточной и генной терапии (International Society for Cell and Gene Therapy, ISCT), 2006 г.
Жизнеспособность клеток оценивают как до замораживания, так и после хранения в жидком азоте.
Бактериологический контроль (стерильность). Для сохранения мезенхимальных стромальных клеток это жесткий показатель, все депозиты МСК должны быть стерильными. Нестерильные депозиты пуповинной крови при других отличных показателях могут быть сохранены как в донорских, так и в частных банках пуповинной крови. Их применяют при необходимости с использованием соответствующего антибиотика. Для этого дополнительно определяют, какой именно возбудитель в пуповинной крови, а также его чувствительность к наиболее известным антибиотикам. В пуповинной крови преимущественно обнаруживают условно-патогенную микрофлору роженицы, особенно после затяжных или осложненных физиологических родов.
Благодаря ответственной работе украинских акушеров-гинекологов процент нестерильных образцов в ГЕМАФОНДе не превышает 1% (мировые нормы – до 7% от всех сохраненных в биобанке депозитов). Все нестерильные депозиты хранятся в биобанке только в отдельных криохранилищах.
Кариотипирование. Для оценки возможных трансформаций генов при культивировании оценивают кариотип клеточной культуры в начале обработки и по завершении процесса изготовления терапевтических доз, ведь клетки проходят несколько циклов культивирования (размножения).
Группа крови и резус-фактор, которые определяют в пуповинной крови считаются относительными показателями. Хотя современные тесты дают небольшую погрешность в определении группы крови и резус-фактора, но в связи с особенностями изучаемого материала (физиологическая антигенная незрелость эритроцитов новорожденных, возможность примесей крови матери и т.п.) группа крови требует подтверждения. Рекомендуется повторить определение группы крови ребенка в 2-4 года.
Каждый этап оценки проходит контроль, валидацию и верификацию. Большинство обследований проводит банк пуповинной крови самостоятельно, поэтому практически каждый биобанк имеет свои клинико-диагностические лаборатории. Для оценки качества сохраненных депозитов биобанки также привлекают внешний контроль и независимые сертифицированные лаборатории.
Все результаты количественных и качественных показателей хранятся в банках пуповинной крови в бумажном и электронном виде. Каждый владелец депозита, сохраненного в ГЕМАФОНДе, получает паспорт Депозита на украинском языке, в котором описаны основные показатели. При необходимости выдается более подробное описание депозита на украинском и/или английском языке, где кроме результатов качественной и количественной оценки описываются и сам процессинг.
Читать больше о современной методике обработки пуповинной крови
Подводя итог, не каждый собранный образец биоматериала, к сожалению, возможно сохранить на будущее даже в частном биобанке. Риск отказа можно минимизировать, если проходить тщательную проверку на инфекционные возбудители при планировании и во время беременности, а также тщательно выбирая роддом и акушера-гинеколога, которые будут проводить сбор биоматериала.
Ознакомиться с работой банка пуповинной крови ГЕМАФОНД и посетить криохранилище имеет право каждый клиент по запросу или на онлайн-лекции, проводимую каждую ІІ и ІV субботу в 11:00.
Регистрация по ссылке Открытая онлайн-лекция о ценности стволовых клеток.