Пуповинная кровь имеет богатый состав.
Она содержит несколько типов стволовых клеток, активные сигнальные факторы, фетальный гемоглобин, уникальные белки. Ценными в пуповинной крови считаются гемопоэтические (кроветворные) стволовые клетки, которые также отвечают за иммунитет. Чем больше таких клеток (кстати, их оценивают по поверхностным маркерам CD34+ и CD45+) и выше их жизнеспособность после размораживания, тем ценнее депозит.
Именно поэтому главной задачей современного банка пуповинной крови является подбор оптимальной методики выделения и сохранения таких клеток. Также криобанки должны постоянно следить за изменениями в клеточной терапии и своевременно оптимизировать свои процессы.
Процесс хранения во всех криобанках одинаков - депозиты хранятся в жидком азоте при температуре
-196 ° С; лаборатории оснащены дополнительными генераторами электроэнергии, но сохранение обеспечивает именно слой жидкого азота. Что касается протоколов обработки, процессов транспортировки и замораживания, затратных материалов и специалистов - банки пуповинной крови могут иметь существенные различия.
Немного статистики Гемафонда по депозитам 2021 года:
Средний объем собранных образцов пуповинной крови - 65 мл
Средняя жизнеспособность стволовых клеток - 95%
Среднее количество выделенных клеток - 900 млн на депозит
Объем собранной пуповинной крови уменьшился по сравнению со сборами 10 лет назад. На этот факт повлияло желание родителей поздно перерезать пуповину и увеличение количества депозитов, полученных после рождения детей с малым весом (двойни, преждевременно рожденные, с врожденными патологиями). Напротив, количество выделенных клеток стало выше практически на 30% благодаря совершенствованию методик обработки.
Пуповинную кровь для своего ребенка в частных банках пуповинной крови начали хранить еще в 1992 году в США. Первые депозиты хранили как одну дозу цельной пуповинной крови. Со временем и накопленным опытом методики переработки менялись, был подобран оптимальный криопротектор (вещество, которое защищает стволовые клетки при хранении при температуре -196 °С) именно для гемопоэтических стволовых клеток - ДМСО.
Впоследствии было обнаружено, что эритроциты в цельной пуповинной крови быстро распадаются, поэтому пагубно влияют на жизнеспособность стволовых клеток и могут быть опасными при применении такого депозита. Перед специалистами встала задача выделить и сохранить слой стволовых клеток без эритроцитов, но с сохранившимися активирующими факторами. Уже в начале 21-века большинство банков пуповинной крови начали сохранять именно выделенный лейкоцитарный слой. Сейчас в мире только в Германии есть криобанк, что до сих пор сохраняет цельную пуповинную кровь.
Основными методиками выделения стволовых клеток является методика двойного центрифугирования и методика седиментации (осаждения) с помощью плотного заменителя крови.
До 2006 года пуповинную кровь обрабатывали только под нужды онкогематологии как заменитель костного мозга. Донорские криобанки, открытые за счет государства, до сих пор сохраняют только большие депозиты. Большинство образцов бракуются и утилизируются как депозиты с недостаточным количеством клеток для лечения взрослого человека с онкогематологией. В тоже время, именно для донорских криобанков разрабатывались первые требования и стандарты, наиболее известными из которых являются FACT и AABB. Согласно международным стандартам, лучшими для хранения в донорском криобанке, являются депозиты обработанные в течение 48 часов, с жизнеспособностью клеток более 70%, количеством клеток - 500 млн. Для частных банков пуповинной крови эти критерии значительно мягче, ведь более 90% персональных депозитов применяются в регенеративной медицине, а не в онкогематологии.
Донорские криобанки также требовали полной автоматизации процессов и могли позволить себе терять примерно 20% клеток за счет использования автоматических аппаратов двойного центрифугирования (например, Sepax). Некоторые частные банки пуповинной крови, особенно в странах с высокой стоимостью труда человека, также вынуждены использовать эти аппараты и методики.
В таких банках пуповинной крови хранится одна доза выделенной лейкоцитарной фракции и спутник 2-5 мл для дополнительных анализов.
После 2006 года взгляд на использование пуповинной крови изменился.
Были получены первые результаты применения ее в регенеративной медицине, в частности для лечения ДЦП, аутизма, задержки развития у детей. К ним присоединились клинические исследования у взрослых - болезнь Альцгеймера, Паркинсона, рассеянный склероз, сахарный диабет и др. Также оказалось, что терапия таких заболеваний, особенно у детей, требует меньшего количества клеток и остаток после применения утилизируется, поэтому целесообразно хранить пуповинную кровь порционно, а не одной дозой.
Прочитать подробнее, что именно лечит пуповинная кровь
Можно утверждать, что современные клиенториентированные частные банки пуповинной крови стараются выделить и сохранить для каждого клиента максимальное количество стволовых клеток с высокой жизнеспособностью. Наиболее эффективной сегодня считается полуавтоматическая методика осаждения лейкоцитарной фракции, содержащей стволовые клетки и активные компоненты; сохранение фракции порционно; переработка пуповинной крови в течение 36 часов после рождения ребенка; тестирование биоматериала по требованию международных стандартов.
Именно эти принципы зафиксированы во внутренних протоколах Гемафонда, ведь мы всегда предоставляли своим клиентам лучшее из существующего.
Интересный факт о Великобритании.
Лидером среди банков пуповинной крови в Великобритании долгое время был Future Health.
Этот криобанк использует при обработке пуповинной крови аппарат Sepax, что выделяет клетки методом двойного центрифугирования и сохраняет выделенную лейкоцитарную фракцию одной дозой. Уже несколько лет более интересным для сохранения стволовых клеток на территории Англии есть другой криобанк - Сells4life. Именно он предложил альтернативную полуавтоматическую методику переработки пуповинной крови методом осаждения и сохранения порционно в криопробирках. Эта услуга дороже, но имеет большой спрос.
Интересно, что Гемафонд использует эту «альтернативную» методику как основную для каждого своего клиента.